A comparative study of the antifungal activity of essential oils of Varronia curassavica Jacq. obtained by different distillation methods / Estudo comparativo da atividade antifúngica dos óleos essenciais de Varronia curassavica Jacq. obtidos por diferentes métodos de destilação

This work aimed to compare the antifungal activity of the essential oil of Varronia curassavica obtained by hydrodistillation and microwave against the fungus Colletotrichum musae and verify the alterations caused by these extraction methods on the leaf surface. This study used four essential oil samples obtained by different methods, two by hydrodistillation [HD1 (1.0 L of water and 100 min.) and HD2 (2.0 L of water and 140 min.)] and two by microwave [MI1 (500W, 20 min, without water) and MI2 (700W, 40 min, with 50 mL of water added to fresh leaves)]. Essential oils concentrations of 0.05, 0.1, 0.5, 1.0, and 3.0% (v / v) were tested in PDA medium. The mycelial growth of C. musae was evaluated by measuring the diameter, every 24 hours up to 144 hours after the beginning of the incubation. Untreated leaves and leaves treated with HD1 and MI1 were prepared for observation in a scanning electron microscope (SEM) LEO EVO 40. The most abundant compounds detected in the essential oil samples analyzed by gas chromatography were: shyobunol, germacrene D-4-ol, E-caryophyllene, bicyclogermacrene, and α-cadinol. Up to 72 hours after the beginning of the incubation, C. musae presented no mycelial growth, even at the lowest essential oil concentration. Conversely, mycelial growth was detected in the control (PDA + DMSO) from 24 hours after incubation. At 144 hours after incubation, regardless of the concentration, the essential oil samples obtained by HD provided lower mycelial growth of C. musae (1.49 cm) when compared with samples obtained by MI (1.80 cm). This difference possibly occurred due to the reduction to less than half of the germacrene D-4-ol content in the samples obtained by MI. The four essential oil samples tested inhibited the mycelial growth and thus presented a inhibitory effect on C. musae. The SEM revealed more drastic changes on the surface of the leaf treated with MI than on those treated with HD. The essential oil of V. curassavica, mainly when obtained by hydrodistillation, has the potential for use in the control of C. musae.

O objetivo do trabalho foi comparar a atividade antifúngica do óleo essencial de Varronia curassavica obtido por hidrodestilação e micro-ondas frente ao fungo Colletotrichum musae e verificar as alterações que esses métodos de extração causam na superfície da folha. Quatro amostras de óleo essencial obtidas em diferentes condições foram utilizadas. Sendo duas por hidrodestilação, HD1 (1,0 L de água e 100 min.) e HD2 (2,0 L de água e 140 min.); e duas por micro-ondas, MI1 (500W, 20 min. sem adição de água) e MI2 (700W, 40 min. com adição de 50 mL de água às folhas frescas). Foram testadas as concentrações 0,05; 0,1; 0,5; 1,0 e 3,0 % (v/v) de óleo essencial em meio BDA. O crescimento micelial do C. musae foi avaliado por medições do diâmetro, a cada 24 horas até 144 horas após o início da incubação. Folhas sem qualquer tratamento e após os tratamentos HD1 e MI1 foram preparadas para observação em microscópio eletrônico de varredura (MEV) LEO EVO 40. Os compostos mais abundantes nas amostras de óleo essencial analisadas por cromatografia gasosa foram: shyobunol, germacreno D-4-ol, E-cariofileno, biciclogermacreno e α-cadinol. Até 72 horas após o início da incubação, não foi observado nenhum crescimento micelial do C. musae, mesmo nas concentrações mais baixas de óleo essencial, enquanto, para o controle (BDA + DMSO), foi observado crescimento do fungo a partir de 24 horas. Após 144 horas, independentemente da concentração, as amostras de óleo essencial obtidas por HD proporcionaram menor crescimento micelial do C. musae (1,49 cm) quando comparadas às amostras obtidas por MI (1,80 cm). Possivelmente essa diferença ocorreu devido à redução para menos da metade, do teor de germacreno D-4-ol, nas amostras obtidas por MI. As quatro amostras de óleo essencial testadas foram capazes de inibir o crescimento micelial, apresentando portanto, um efeito inibitório sobre o C. musae. Alterações mais drásticas observadas através da MEV foram visualizadas na superfície da folha submetida ao processo de extração por MI em comparação à HD. O óleo essencial de V. curassavica, sobretudo o obtido por hidrodestilação, apresenta potencial para o controle de C. musae.

Essential oils of Varronia curassavica accessions have different activity against white spot disease in freshwater fish.

The aim of this study was to evaluate the antiprotozoal activity of essential oils from Varronia curassavica accessions against different stages of Ichthyophthirius multifiliis. Essential oils from each accession were tested in vitro at the concentrations 0, 10, 25, 50, 75, 100, and 200 mg/L. The VCUR-001, VCUR-202, VCUR-509, and VCUR-601 accessions presented the major compounds α-pinene, germacrene D-4-ol, (E)-caryophyllene and epiglobulol, and sabinene, respectively. These isolated compounds were tested in vitro at a concentration proportional to that found in the essential oil which caused 100% mortality of the parasite. The concentrations of 10 and 50 mg/L of the essential oil of accession VCUR-202 provided 100% mortality of trophonts and tomonts, respectively. For the accession VCUR-509, 100% mortality of trophonts and tomonts was observed at concentrations 75 and 200 mg/L of essential oil, respectively. The same mortality was observed at concentration 200 mg/L in both stages of the parasite for the other accessions. The major compounds α-pinene, sabinene, and the (E)-caryophyllene + epiglobulol mixture caused 100% mortality of trophonts and tomonts. The in vivo assay for white spot disease control was performed in a therapeutic bath of 1 h with the essential oil of accession VCUR-202 at concentrations of 0.5 and 2.0 mg/L. A significant reduction of about 30% of trophonts on infected fish was observed, independent of the oil concentration. The V. curassavica essential oil, especially the VCUR-202 accession, is a potential source of raw material for the formulation and commercialization of bioproducts to control freshwater white spot disease in fish.

Diversidade e estrutura genética de populações de Varronia curassavica Jacq. em restingas da Ilha de Santa Catarina / Genetic diversity and structure of Varronia curassavica Jacq. populations in the restinga of Santa Catarina Island

RESUMO Varronia curassavica Jacq. (Boraginaceae) está presente na vegetação de restinga e apresenta relevantes propriedades medicinais. A espécie é explorada especialmente por comunidades locais e pela indústria farmacêutica, porém, carece de informações ecológicas e genéticas a seu respeito. Nesse contexto, o estudo foi conduzido com o objetivo de caracterizar a diversidade genética de três populações de V. curassavica em áreas de restinga na Ilha de Santa Catarina. Foram coletadas folhas de 50 indivíduos adultos em cada uma das três áreas de estudo e as frequências alélicas das populações foram obtidas a partir de 14 locos alozímicos. Foram encontrados 25 alelos distintos nas três populações, sendo dois alelos exclusivos. As populações apresentaram diversidade genética média de 0,111 e índice de fixação médio de -0,060 (-0,273 até 0,222). Os níveis de diversidade são intermediários, semelhantes aos exibidos por espécies da mesma família ou de características ecológicas semelhantes. Os índices de fixação foram todos significativos e discrepantes entre as populações, sendo que duas delas apresentaram excesso de heterozigotos. A divergência genética interpopulacional foi significativa e igual a 0,079, considerada moderada e sugerindo efeitos de subdivisão populacional. Os níveis de diversidade genética encontrados e a redução populacional causada pela redução e fragmentação dos habitats em que a espécie ocorre sugerem medidas de conservação ex situ e demandam maior rigor na proteção legal de áreas de proteção permanente.

ABSTRACT The Varronia curassavica Jacq. (Boraginaceae) is present in restinga vegetation and shows relevant medicinal properties. The species is exploited by local communities and by the pharmaceutical industry; however, it lacks ecological and genetic information. Thus, this study aimed to characterize the genetic diversity of three V. curassavica populations in restinga areas of Santa Catarina Island. Leaves of 50 adult individuals were sampled in each of the three study areas and the allelic frequencies were obtained from 14 allozyme loci. Twenty-five different alleles were found in the three populations, two of them being exclusive. The populations showed, on average, a genetic diversity of 0,111 and a fixation index of -0,060 (-0,273 to 0,222). The diversity levels are intermediary, similar to those ones owned by species of the same family or with similar ecological traits. The fixation indexes were all significant and discrepant among the populations, with two of them showing excess of heterozygotes. The genetic divergence among populations was significant and equal to 0,079, which is considered moderate and suggests effects of population subdivision. The levels of genetic diversity found and the population decrease caused by reduction and fragmentation of habitats in which the species are present implies in ex situ conservation measures and a higher enforcement of the legal preservation of permanent protected areas.

Ocorrência de Dictyla monotropidia Stål (Hemiptera: Tingidae) em Cordia verbenacea Al. DC no Brasil / Occurrence of Dictyla monotropidia Stål (Hemiptera: Tingidae) on Cordia verbenacea Al. DC in Brazil

Recentemente, observaram-se plantas de erva-baleeira (Cordia verbenácea Al. DC) sendo atacadas pelo percevejo Dictyla monotropidia Stål. As colônias foram encontradas na superfície abaxial das folhas, onde ninfas e adultos sugavam a seiva do floema, causando encarquilhamento, seguido de amarelecimento e queda de folhas. D. monotropidia já foi relatada como praga de outras espécies de Cordia em países das Américas Central e do Sul, entretanto, este é o primeiro relato do inseto atacando plantas de C. verbenacea no Brasil.

Recently, Dictyla monotropidia Stål was observed feeding on plants of black sage (Cordia verbenacea Al. DC). The colonies of this insect were observed on abaxial surface of leaves, with nymphs and adults sucking the phloem sieve, causing spot, yellow aspect and leaf fall. D. monotropidia was already related as pest in other Cordia species in countries of Central and South America. Although, this is the first report of this insect attacking plants of C. verbenacea in Brazil.